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第1篇

論文摘要 總結了蘇云金桿菌的發現及殺蟲機理，對蘇云金桿菌的研究現狀、研究中存在的問題及解決的思路進行了闡述，并對蘇云金桿菌的應用前景進行了展望。

新型微生物農藥作為無公害農林生產資料，在未來的農作物病蟲害防治方面將有巨大的市場需求。進一步加快微生物農藥的研制、產業化和推廣應用進程，降低農藥在農副產品中的殘留和對農田生態環境的污染，實現農作物重大病蟲害的可持續控制，必將產生巨大的社會、經濟和生態效益。

1蘇云金芽孢桿菌(Bt)的發現及殺蟲機理

1.1蘇云金芽孢桿菌(Bt)的發現

1901年日本學者石度繁從患猝倒病的家蠶幼蟲中分離到第1個產生晶體的芽孢桿菌。10年后Berliner從德國蘇云金地方一家面粉廠染病的地中海粉螟中分離到一個相似的菌株，并正式定名為蘇云金芽孢桿菌(Bt)。4年后，一個叫克林諾的科學家發現，在這種細菌的細胞中可以形成方形或菱形的晶體，可惜這個發現并未被重視。直到40年后的1953年，一位叫漢納的生物學家證明了這種晶體是有毒的蛋白質晶體，才揭示了粉螟死亡的原因。在1920~1930年間，Bt作為微生物殺蟲劑主要用來防治玉米螟。1938年第1個商品制劑Sporeine在法國問世，從此拉開了生物殺蟲劑的序幕。以后相繼發現了對鞘翅目、螨類、同翅目、膜翅目、直翅目昆蟲、動植物寄生線蟲、鞭毛蟲、變形蟲、吸蟲、絳蟲有毒殺作用的Bt菌株。

進一步的研究發現，Bt是革蘭氏陽性菌，另外，它可寄生在一些蛾類和蝶類的幼蟲上，甚至是植物表面。

蘇云金芽孢桿菌分泌出的由Cry基因編碼的、有殺蟲活性的δ-毒素(或被稱為殺蟲晶體蛋白)的蛋白結晶構成了內孢子。Cry蛋白對鱗翅目(如蛾與蝶)、雙翅目(如蒼蠅、蚊子)和鞘翅目(甲蟲)有很大殺傷力。因此，可將蘇云金芽孢桿菌發酵生產制成高效生物殺蟲劑，或用Cry基因制成防蟲害的轉基因產品。

1.2蘇云金芽孢桿菌(Bt)的殺蟲機理

蘇云金芽孢桿菌(Bt)之所以能夠殺蟲，是由于它們的細胞內存在著一種有毒的蛋白質，叫做伴孢晶體，昆蟲吞食后就會中毒而死。而這種活細胞及伴孢晶體對環境無毒無害。因為在動物的胃腸道內，酸性環境下蛋白質晶體不能溶解，從而對人畜無害。所以它是一種高效安全的生物殺蟲劑，可用來殺滅多種農作物害蟲。蘇云金芽孢桿菌(Bt)殺蟲機理主要是:昆蟲取食蘇云金芽孢桿菌后，桿菌在其胃腸道內產生蛋白質晶體內毒素(δ-內毒素)、熱穩定毒素(β-外毒素)、葉蜂毒素(α-外毒素)及Bt-γ外毒素。這些毒素能侵蝕昆蟲腸道細胞，破壞腸道內膜，并進入血淋巴組織，使害蟲因饑餓而出現敗血癥最后死亡。蘇云金芽孢桿菌的防治對象是鱗翅目、膜翅目、雙翅目、鞘翅目等多種害蟲，其藥性的持效期可達7~10d左右。需要特別注意的是:蘇云金芽孢桿菌(Bt)及其制劑對蠶具有很高的毒性，桑園必須禁用。另外，勿與堿性殺菌劑混合施用，晴天的傍晚或陰天施藥效果最佳。

2蘇云金芽孢桿菌(Bt)的研究現狀

2.1蘇云金芽孢桿菌(Bt)的研究主要集中在分子水平上

過去Bt是作為一種制劑應用于農林害蟲的防治，隨著生物技術的發展，現在已對蘇云金芽孢桿菌的殺蟲蛋白質和相關基因作了深入而透徹的研究，也就是說在基因的水平上對它有了更多的了解。研究發現，在其體內具有一種Cry基因，正是這種基因編碼產生的蛋白質對上述昆蟲具有極大的毒性，所以這種基因的結構和特性就影響到它本身，也影響到它的殺蟲范圍。當然某一基因的長期應用會刺激昆蟲產生抗體。因此，現在對蘇云金芽孢桿菌的研究更多地集中在分子水平上。 轉貼于

2.2國內主要研究成果

中國現在在蘇云金芽孢桿菌殺蟲劑的商品化生產和防治農林害蟲的系統工作方面，取得的主要成果有:研制和生產質優價廉的Bt懸浮劑和高效價的粉劑，實現了中國Bt殺蟲劑的商品化生產;建立了以生物測定為基礎的產品毒力效價測定的質量標準化技術化系統;研究了助劑及貯存條件對Bt的影響，為助劑的篩選和有效存貯提供了可靠的依據;大規模推廣應用Bt殺蟲劑以防治棉、糧、果疏及林業害蟲，并取得了良好的效果。該研究中研制和生產的適合中國的優質廉價的Bt懸浮劑，已在農林害蟲防治中得到廣泛應用;Bt粉劑的毒力效價和防蟲效果，已達到國際同類產品先進水平;以棉鈴蟲和小菜蛾為標準昆蟲，建立了中國Bt產品質量標準化測定技術系統，為國產Bt殺蟲劑的行業標準的建立奠定了良好基礎，為與Bt殺蟲劑國際質量標準接軌提供了保障。

3研究中存在的問題及解決的思路

3.1主要問題

蘇菌基因的表達會發生變化。例如，如果溫度不理想，就可能降低毒素的產生，使植物易受侵蝕。更加嚴重的是，試驗證明毒素減少的晚季植物會形成啟動子的DNA甲基化。 另外，毒素的持續使用會使普通害蟲演化為抗性蟲。試驗發現，小菜蛾對蘇菌毒素的噴霧形式就已產生抗性。

蘇菌毒素的運用還有一些可能的危險，如:如果轉基因玉米與變異野草雜交，蘇菌基因的抗性就有可能因食物鏈來到食草動物群落中，蜂群衰竭失調(CCD)，也可能跟蘇菌轉基因作物有關。

3.2解決的思路

(1)有抗植株與無抗植株間種。減少害蟲抗藥性的一個有效方法就是將有抗植株與無抗植株間種，目的是減少抗性基因頻率，犧牲少量無抗植株保證產量。美國和歐洲的某些區域已經立法要求使用上述方法種植。這種方法的理論依據是假設抗性基因是隱性的。依目前來看，這種方法應該可以延遲害蟲對蘇菌的抗性;另一方面，假如產生了多種蘇菌毒素的農作物可以完全滅絕害蟲，抗性基因的存在也就不可能了。不過，至今為止，害蟲滅絕的情況還未出現。

(2)通過接合構建新菌株。蘇云金芽孢桿菌菌株的特定質粒可以自行轉移，這些質粒可以通過接合來構建新菌株。例如，科羅拉多馬鈴薯甲蟲(鞘翅目)是北美最具破壞性的馬鈴薯害蟲，歐洲玉米螟和土豆塊莖蠕蟲，對馬鈴薯也有很大的破壞作用。從自然界中分離的蘇云金芽孢桿菌菌株，沒有一個菌株對所有這些昆蟲都具毒性。然而，通過質粒轉移雜交，現在已經構建出對3種害蟲都有效的新菌株，田間試驗表明，該菌株作為廣譜的馬鈴薯殺蟲劑很有前途。

4蘇云金芽孢桿菌(Bt)的應用前景

微生物農藥是21世紀農藥工業的新產業，代表著植物保護的方向，其最大的優勢在于能克服化學農藥對生態環境的污染，并減少農藥在農副產品中的殘留量。同時，在推廣微生物農藥應用過程中，農副產品的品質和價格將大幅度上升，有力地促進農村經濟增長和農民增收，社會效益不可估量。

我國是一個農業大國，農業的發展事關重大。為了更好地落實科學發展觀，建立環保型、節約型農業，微生物農藥將為農產品優質安全生產和降低有毒物質殘留提供技術和物質保證。微生物農藥研究與發展，將有效地實現農產品的優質安全生產，提升農產品的經濟附加值，擴大我國農副產品外銷市場，推進綠色產業的發展。所有這些均對發展農村經濟、增加農民收入、促進農村繁榮具有重要的推進作用。

參考文獻

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第2篇

【關鍵詞】 反義 寡核苷酸 乳腺癌 HER2 mRNA 紫杉醇

0 引言

乳腺癌的化學治療近年來有了長足的進展，然而，經多線治療仍復發轉移的晚期患者的治療，仍然十分棘手。探索包括生物靶向治療在內的新療法已成為近年研究的熱點之一。

本研究室的前期研究表明，以HER2 mRNA為靶點的特異性硫代反義寡核苷酸，可以抑制HER2過表達乳腺癌細胞株增殖活性[1]。本研究擬對既往合成的反義寡核苷酸HA6722 單用或與紫杉醇聯用時的抗乳腺癌活性進行研究，試圖探索乳腺癌治療新方法。

1 材料與方法

1.1 細胞系及培養

本研究采用的細胞株有：MDAMB453（HER2過表達），細胞培養所需的培養基為L15（Gibco， BRL），內含10%的胎牛血清（FCS，Hyclone），置37℃、不含CO2的培養箱中培養；MDAMB231（HER2低表達）的體外培養采用RPMI1640（Gibco， BRL）培養基，內含10%的胎牛血清（FCS，Hyclone），置37℃、含體積分數為5%的CO2培養箱中培養傳代。當細胞生長至80%～85%融合時用0.25%胰蛋白酶消化，傳代和收集細胞。

1.2 硫代反義寡核苷酸的合成及體外脂質體轉染

反義寡核苷酸的靶向HER2 mRNA反義寡核苷酸HA6722序列為含20個核苷酸的寡聚核苷酸，其命名原則及合成見文獻報道[2]。全程硫代修飾，由北京賽百盛基因技術有限公司合成。序列如下：HA6722：5′CAG CAG CCG AGC CAG CCC GA3′

瓊脂糖凝膠電泳結果表明反義寡核苷酸純度符合要求。反義寡核苷酸以無血清無抗生素的L15或RPMI1640培養基溶解濃度為50μmol·L-1的溶液，過濾除菌，-20℃儲存，臨用時稀釋至所需濃度。

反義寡核苷酸體外脂質體轉染按Invitrogen， Gibco BRL公司脂質體轉染說明書所述方法進行。當培養細胞達到65%～70%融合時，進行轉染，具體方法見文獻[3]。

1.3 紫杉醇 由海南海藥公司提供，30mg/支，臨用時以無菌生理鹽水稀釋成所需濃度。

1.4 噻唑藍（methyl thiazolyl tetrazolium， MTT）法檢測細胞活度 取對數生長期的上述細胞，以不同數量接種96孔培養板（Costar，USA），接種數量分別為：MDAMB453 5×104/孔、 MDAMB231 2×104孔。實驗組及對照組細胞培養均設三個平行孔。待細胞生長至65%～70%融合時，用脂質體2 000將不同濃度的HA6722轉染細胞4～6h，再加入同摩爾濃度的紫杉醇，隨后繼續培養24～72h，傾去培養液，加新鮮配置的MTT溶液（0.5mg/ml）200μl，繼續孵育4h，吸去MTT溶液，每孔加200μl DMSO， 輕輕震蕩20～30min，酶聯儀測定光吸收值（OD值）。

1.5 細胞凋亡（apoptosis）檢測 凋亡試劑盒購自北京中山生物技術有限公司。以100nmol·L-1的HA6722及紫杉醇分別單獨處理MDAMB453細胞12h，以及用50nmol·L-1的HA6722和相同濃度的紫杉醇先后作用MDAMB453乳腺癌細胞6h，收集經紫杉醇及HA6722單藥或聯合作用后的MDAMB453乳腺癌細胞，離心涂片，按操作說明檢測細胞凋亡。細胞核內出現棕褐色沉淀為陽性，反之為陰性。凋亡指數（AI）=（凋亡細胞數/計數總細胞數）×100%。

1.6 反義藥物及紫杉醇的療效評價

對數生長期的MDAMB453細胞及MDAMB231細胞經系列濃度的HA6722及紫杉醇單用或聯合作用后， MTT法測定OD值。紫杉醇單用時的系列終濃度為1、4、16、64、250及1 000nmol·L-1，而HA6722單用時的系列終濃度為12.8，32，80，200，500，1 250nmol·L-1；聯合應用時二者以等摩爾濃度混合，系列濃度依次為6.4、16、40、100、250及625nmol·L-1，反應終體積為200μl。生存分數f按下述公式計算：f=ODtreat/ODcontrol(1)

聯合方案的療效評價按有關文獻進行[4，5]，即以log(1/f1)對log（藥物濃度）作圖，并行線性擬合，得曲線的x軸截距即為log（IC50），和直線斜率m，利用下述公式計算產生效應f時的單藥及聯合時的藥物濃度：Dosef=DoseIC50[(1/f)1]1/m (2)

由于聯合方案采用的是固定摩爾濃度比，因此產生效應f的藥物濃度可分解為聯合藥物的濃度（D）1和（D）2，對于產生任一效應f時的藥物聯合指數(combine index，CI)可以下列公式算出：

CI＝（D）1（Df）1＋（D）2（Df）2＋α（D）1（D）2（Df）1（Df）2(3)

式中（D）1和（D）2分別代表聯合用藥產生效應f時的濃度，而（Df）1和（Df）2分別代表藥物單用時產生效應f時的濃度；根據推測兩藥不排斥或相互排斥的可能，α取值1或0；CI反映二藥聯合的相互作用，大于1表示拮抗，等于1表示相加，小于1表示協同。全部試驗均進行3次以上重復。

1.7 統計學處理

采用SPSS10.0統計分析軟件進行統計學處理，實驗數據以±s表示，均數比較采用Student’s t檢驗和方差分析F檢驗（One Way Anova）。

2 結果

2.1 HA6722及紫杉醇單用時對兩種乳腺癌細胞的抑制作用

在1、4、16、64、250及1 000nmol·L-1的終濃度下，紫杉醇對兩種乳腺癌細胞的生長均顯示劑量依賴性抑制作用，其抑制的IC50值分別為19.4±4.1nmol·L-1及23.6±5.7nmol·L-1，見圖1A；而在12.8、32、80、200、500、1 250nmol·L-1的系列濃度作用下，HA6722對兩種不同HER2表達水平的乳腺癌細胞的體外生長的影響迥然不同，對HER2過表達的MDAMB453細胞呈現明顯的劑量依賴性抑制，而對HER2低表達的MDAMB231細胞則幾乎沒有抑制， IC50分別為47.6±7.9nmol·L-1和731.8±14.3nmol·L-1(n=3，P＜0.01，見圖1B。

2.2 HA6722及紫杉醇乳劑合用對MDAMB453乳腺癌細胞的抑制作用

從上述初步結果可以看到，12.8nmol·L-1濃度的HA6722對MDAMB453細胞的抑制率只有4.7%，因而該濃度被作為非治療濃度用于增強紫杉醇的藥理作用研究，結果表明，由于該濃度HA6722的加入，紫杉醇對MDAMB453細胞的抑制作用增強，IC50值由19.4±4.1nmol·L-1降至13.6±5.2nmol·L-1（n= 3，P＜0.05）。

等摩爾濃度的HA6722與紫杉醇合用的研究表明，經6.4、16、40、100、250及625nmol·L-1的兩種藥物共同作用，MDAMB453細胞增殖呈現更為明顯的抑制，見圖2 A、B、C。在IC50濃度下的聯合指數CI為0.85±0.16(n=3)，在研究涉及的全部藥物濃度范圍內，兩種藥物的聯合指數波動在（0.85±0.11）～（0.87±0.27）之間，見圖2D。

轉貼于

為了澄清HA6722與紫杉醇協同抗腫瘤作用是否具有細胞選擇性，對HER2低表達的乳腺癌細胞株MDAMB231細胞也進行了同樣的研究，結果表明，等摩爾濃度的二種藥物合用對該細胞株的聯合指數在所檢測的藥物濃度下，波動在（1.13±0.21）～（1.19±0.24）之間，見圖3。

2.3 HA6722及紫杉醇乳劑合用對MDAMB453乳腺癌細胞凋亡的影響

經100nmol·L-1的HA6722及紫杉醇分別單獨處理或以50nmol·L-1的HA6722和相同濃度的紫杉醇先后作用MDAMB453細胞后，TUNEL法對細胞凋亡的檢測顯示，HA6722與紫杉醇合用增強了細胞的凋亡作用（n=3，P＜0.05），見表1。

3 討論

業已證明，原癌基因HER2過表達是一個獨立的、不良的預后指標，將導致乳腺癌患者對某些化療方案耐藥[6]，生存期縮短[7]。

圖1 紫杉醇及反義寡核苷酸HA6722單用時對兩種乳腺癌細胞株，MDAMB453及MDAMB231細胞體外增殖的影響（略）

圖3 等摩爾濃度的HA6722與紫杉醇合用時對MDAMB231聯合指數隨生存分數的變化曲線（略）

圖2 紫杉醇和HA6722單用或聯合時對MDAMB453細胞增殖的影響（略）

表1 HA6722與紫杉醇單用或聯合應用對MDAMB453細胞凋亡的影響（略）

MDAMB453組*P

紫杉醇是一種新型的抗微管集聚劑，是當前乳腺癌治療中療效較高的藥物之一。然而，由于絕大部分細胞毒藥物存在劑量限制性毒副作用（DLTs），因而單用化療藥物不但無法治愈腫瘤，而且還會產生嚴重的毒副作用。事實上，一度被認為乳腺癌根治希望所在的大劑量化療（HDCT）加干細胞支持療法也并沒有達到根治甚至是有效改善乳腺癌患者預后的目的[8]。

生物靶向治療近年逐漸成為研究的焦點，以bcl2等基因為靶點的反義藥物G3139已在體外及體內研究中均顯示出明確的抗腫瘤作用，并可增強細胞毒藥物的抗腫瘤效果[9，10]。如采用反義藥物與細胞毒藥物聯合的辦法，能在不影響抗腫瘤效果的前提下，降低細胞毒藥物的用量，減少或避免毒性反應的發生，不失為一種兩全的策略。本研究對反義藥物HA6722與細胞毒藥物紫杉醇對乳腺癌細胞體外增殖進行了相關研究。結果表明， 以低劑量（非治療劑量）的HA6722與紫杉醇聯合，可以引起紫杉醇抗MDAMB453細胞增殖活性的明顯增強，IC50值由19.4±4.1nmol·L-1降至13.6±5.2nmol·L-1（n=3，P＜0.05）；而等摩爾濃度的上述兩種藥物聯合，其對MDAMB453細胞的抗增殖作用較之兩倍濃度的單藥作用更強。在IC50濃度下兩藥的聯合指數CI為0.85±0.16(n=3)，表明二者合用對HER2過表達的MDAMB453細胞的抑制作用是協同的。

本研究對兩種藥物合用時對乳腺癌細胞的凋亡過程進行了觀察。結果表明，合用時MDAMB453細胞凋亡率明顯強于二藥之一的單獨應用，與文獻報告一致[11，12]。

本研究尚對另外一種HER2正常表達細胞MDAMB231細胞進行了研究，結果表明，HA6722和紫杉醇合用并未引起抗腫瘤活性的增強，進一步說明，這兩種藥物的協同抗腫瘤作用，是以乳腺癌細胞的HER2基因乃至受體過表達為前提，其詳細機制有待于進一步研究。

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第3篇

【關鍵詞】四氫生物蝶呤；心肌缺血再灌注損傷； 三磷酸腺苷敏感性鉀通道；

一氧化氮合酶

Role of the tetrahydrobiopterin in Myocardial preconditioning: Possible Involvement of Mitochondrial KATP Channels and Nitric Oxide Synthase

ZHONG Biao1, ZHONG Huan-qing2, CHEN Hai-sheng2.

1.Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery, Huizhou Municipal Central Hospital, Huizhou, Guangdong Province, 516000, China

2.Department of Cardiovascular Surgery, Gaozhou People’s Hospital, Maoming, Guangdong Province, 525200, China

【Abstract】ObjectiveTo study the effect of tetrahydrobiopterin(BH4),5-hydroxydecanoate (5-HD) and Nω- nitro-L-arginine methyl ester(L-NAME) on langendorff rabbit heart model. MethodsSixty-four mature rabbits were randomly divided into four groups. The hearts in vitro removed to Langendoff equipment, then perfused with different buffer solution base on the Krebs-Henseleit buffer(KHB) for 30min. Then cardiac arrest was induced for 30min followed by 60min reperfusion. Coronary flow(CF) was recorded. Coronary effluent solution was collected for CK measurion. The dynamic change of myocardial NO content was measured. ResultsBy the treatment with BH4, CF was significantly increased, and CK was decreased than other groups after reperfusion(P

【Key words】 Tetrahydrobiopterin; Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury; ATP-Sensitive Potassium Channels; Nitric Oxide Synthase

BH4是所有NOS同功酶的輔助因子，具有穩定NOS結構、穩定NOS活性二聚體、增加L-精氨酸和NOS結合力、促進NO的合成與釋放等作用，與內皮功能密切相關[1,2]。外源性補充BH4能保護缺血再灌注心肌[3]，但是具體作用機制仍不清楚。本實驗通過觀察四氫生物蝶呤(tetrahydrobiopterin, BH4)、5-羥基癸酸鹽(5-hydroxydecanoate, 5-HD) 和左旋硝基精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-arginine methyl ester, L-NAME)對缺血再灌注心臟冠脈流量（coronary flow, CF）、一氧化氮(nitric oxide, NO)含量、肌酸激酶（creatine kinase, CK）的影響，研究線粒體三磷酸腺苷敏感性鉀通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel, mitoKATP) 、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)對四氫生物蝶呤減輕心肌缺血再灌注損傷（myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI）作用的影響，探討四氫生物蝶呤保護缺血再灌注心肌作用的可能機制。

1 材料和方法

1.1 實驗動物與分組

健康成熟的大白兔64只(廣東醫學院動物中心提供，體質量2.0~2.5 kg，雄雌各半)，隨機數字表法隨機分入對照組（組Ⅰ）和BH4組（組Ⅱ）、BH4+ L-NAME組（組Ⅲ）、BH4+5-HD組（組Ⅳ），每組16只。

1.2 主要儀器和試劑

自制Langendorff離體心臟灌注裝置，全自動生化分析儀(美國Beckman公司, CX-4 型)，L-NAME、5-HD、BH4購自美國Sigma公司。NO檢測試劑盒購自南京建成生物有限公司。

1.3 離體心臟Langendorff灌流模型

實驗動物3%戊巴比妥鈉(30 mg/kg)麻醉，肝素鈉(150 IU/kg)抗凝后，迅速開胸取出心臟，立即浸入4℃ K-H液中，排盡殘血，連接于Langendorff模型灌注裝置上，以37℃ K-H液經主動脈插管逆行灌注30 min，灌注壓恒定為70 cm H2O，灌注液持續通入95%O2-5%CO2混合氣(流量3 L/min)。停搏前20 min BH4+ L-NAME組（組Ⅲ）、BH4+5-HD組（組Ⅳ）分別用加入L-NAME、5-HD的K-H液進行灌注10min。停搏前10 min BH4組（組Ⅱ）、BH4+ L-NAME組、BH4+5-HD組均用加入BH4的K-H液灌10 min。經30 min灌流后，灌注40 ml 4℃ St. Thomas心臟停搏液進行停搏，時間30 s。心臟停跳期間溫度保持在37℃~38℃。心臟缺血30 min后，以37℃ K-H液再灌注60 min。

BH4、5-HD、L-NAME最終濃度為10、100、100 μmol/L。

1.4 觀察指標及方法

1.4.1 在灌注10min、再灌注10 min、再灌注30 min、再灌注60 min4個時點收集冠脈流出液記錄冠脈流量CF。

1.4.2 全自動生化分析儀分析上述4個時點冠狀動脈流出液CK含量。

1.4.3 分別取缺血30 min、再灌注60 min的心室肌，硝酸還原酶法測定心肌組織NO含量。

1.5 統計學處理

數據以均值±標注差（ ±s）表示，用SPSS 13.0軟件進行統計學分析。組間、組內數據比較均用方差分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1與對照組相比，用含BH4的K-H液灌注的組Ⅱ再灌注后的CF、心肌組織NO含量增加(P

2.2使用含NOS抑制劑L-NAME（組Ⅲ）或mitoKATP抑制劑5-HD（組Ⅳ）預處理，與組Ⅱ相比，CF降低(P

3 討論

內、外源性NO在缺血預適應(ischemia preconditioning, IP)心肌保護中(包括早期、第二期)起重要作用，不僅是觸發因子，也是效應因子[4]。機體內產生的NO是由NOS催化非必需氨基酸左旋精氨酸(L-arginine, L-Arg)和O2生成的。BH4是所有NOS同功酶的輔助因子 [1-2]。內源性NO的生成量嚴格依賴適當的BH4水平[5]。BH4水平的減少可導致NOS功能失調，產生過量的氧自由基而代替NO的產生，進而導致內皮和心肌細胞功能降低[6]。

CK絕大部分存在于心肌細胞胞漿內，心肌細胞以外含量甚微，是一種心肌特異性酶。所以，檢測冠脈回流液中CK的含量可以反映心肌酶漏出的程度，間接反映心肌損傷程度[7]。CF的多少則可反映冠狀動脈的擴張程度，從而觀察冠脈內皮細胞的功能和損傷程度。

mitoKATP被公認為是心肌保護作用中的一個關鍵環節[8]。mitoKATP的開放不僅參與IP的第一窗保護作用，而且也參與第二窗保護作用，不僅能作為啟動因子誘導IP，同時也是IP重要的效應器。它的開放能減輕MIRI [9]。

實驗結果提示外源性BH4可提高NOS的活性，促進內源性NO的產生，發揮NO對心肌和冠狀血管內皮的保護作用，減少CK的漏出，增加CF。表明BH4能增強冠脈系統的擴張，有利于停搏液在心肌的均勻分布和降溫，而在再灌注時則促進有害物質排出，減輕心肌酶的漏出，從而減輕心肌損傷，而這種保護作用也與mitoKATP的開放有關。

參考文獻

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第4篇

撰寫人：___________

日

期：___________

2021年保險公司轉正工作總結

記錄是最好的一種督促自己成長的方式，記錄也是最好的見證自己成長的方式。莎總說：沒有記錄就沒有發生。從今天起，堅持寫工作日志，試問你自己就不寫工作日志，你怎么能要求外勤伙伴寫呢?你有什么資格?一天不重要，十天不重要，一個月，一個季度，一年呢?學會養成自己的工作包括生活的習慣。每天堅持將自己的工作，分為新人檔案，績優檔案，主管檔案進行記錄。我今天要做什么?我今天做了些什么?他們今天要做什么?他們今天做了些什么?有沒有達到預期值?有哪些東西需要馬上更正或者是補充的建立自己的工作模式，工作線條，刻不容緩!

記錄，是一筆財富。計劃性的記錄與總結性的記錄更是一筆財富。

除了上述的這些，當然還有很多很多的感悟，以及感悟后后期要做，比如客戶經營，客戶經營不僅僅是計劃1的經營，作為一名組訓，更多更重要的是將客戶經營的概念植入到我們自己，植入到業務員的骨髓深處，___產說會沒有人，其實就是客戶經營出了問題。除了每天檢查工作日志外，還要檢查客戶檔案并輔導建立和完善客戶檔案，還包括客戶的緊急聯絡卡，方便拓展客戶。

當然也還有學到實戰性的課程壽險與家庭財務規劃。我們的客戶到底在煩惱什么：是買車或者是還房貸重要還是買保險重要?以客戶的心理分析問題，因為客戶往往只___自己面對的問題;家庭的風險并不僅僅是___問題，是的，您買房需要錢，您孩子的教育需要錢，您的養老需要錢，其實您的一生哪都需要錢，那你就必須需要有一個專業的金融工具提供幫助。老祖宗說：要留足過冬的糧食，可是儲存的地方不好，會留存到冬天嗎?第一次深刻懂得：保險的目的不是改變生活，而是防止現有的生活被改變。很多人都追求有錢有權，李雙江有錢嗎?有，有權嗎?有，可是他快樂嗎?不快樂!重點看錢怎么用。確實，聽鄭老師的家庭財務規劃，讓你覺得你就是在與客戶心與心之間的對話。如果我們的績優能做到這一點，如果我自己能讓我們的外勤伙伴做到這一點，保險市場將是何其之大，何其之廣!

要說感悟和啟發，還有很多很多，那就把這還有很多很多的感悟和啟發___，落實到工作行動當中吧。一路走來風雨人生，曾經的困苦和挫折化為前行的力量，感受了生命蛻變的痛楚和成長的喜悅，讓我不斷的成長進步充實.

為期四天的培訓，總公司給本次培訓傾注了大量心血，配備了強大的講師陣容，生話上的無微不至，學習上的傾囊相授.足見對我們的重視和關愛!通過對行業前景展望的學習，知道了蓬勃發展的___;感受了生命力量中的生命速度生命現象生命奇跡;明白了家庭財務規劃一定要站在利他行善的立場上，才能更好地為客戶保駕護航;懂得了專業化銷售流程輔導，對新人專業系統實戰的意義所在，更好地喚醒客戶的潛在需求;理解了只有用心經營好客戶管理，分清ABCD類客戶有的放矢，培育好影響力中心，才能唯有源頭活水來;領悟了一切成交來自于服務的內涵。

在這個沒有硝煙的壽險戰場上，群雄逐鹿諸候爭霸。通過對績優建設的學習，才知善抓新人者長、善抓主管者久、善抓績優者強的含義所在。讓理念、架構、節奏、模式植入腦海并身躬力行;用好公司的榮譽體系和節點方案，實現季度、月平臺的維持和增長。應該說團結就是力量，共識才能共為，營業區的保費和穩步發展一定來自高效會議經營。因為只有統一思想才有戰斗力。在這個無利不起早的浮躁時代，用好基本法幫外勤精打細算，激發內心欲望啟動意愿而更好更快地升官發財，實現可持續發展。牢記一個人不愿意承受工作壓力，就永遠地承受生活壓力的警鐘;用空杯心態同時放大空杯容納萬物，且行且思且感且悟!

應該說本次培訓非常實戰實用實際，我們來這里不但是學習，更重要的是做到學有所知學有所行學有所悟，求新求變求發展。把知識轉化為生產力，讓外勤隊伍獲得能量更好地展業增員，才是自己存在的價值。這就要求我不能只做語言上的巨人，行動上的矮人。只有勇敢地承擔責任，才能承擔更大的責任地。內勤松一尺外勤就會松一丈，就更需要我們意志堅定充滿___以終為始，做個有心人。同業務員抱成一團打成一片然后舉一反三，做好四訓一會，季經營月經營周經營日經營的細化和量化，協助營服經理做好份內份外的工作。

萬丈紅塵三杯酒，千秋大業一壺茶，大道無疆大方無域，在人生的舞臺上，人生因夢想而偉大，因務實而成真。如何叫長河為酥酪變大地為黃金?珍惜身邊的人眼前的人，只要你敢想敢做，敢超越敢創新，則一切皆有可能!

但一切從一名組訓做起，一名站著能講、坐著能寫、躺著能想的合格、優秀的組訓。

第5篇

今天，當我重新理解這段話的含義，便發現它被賦予了更深刻的內涵，那就是愛崗敬業，無私奉獻。今天，我要贊美這么一群人，她們就是國壽的全體巾幗女員工。

伴隨著國壽業績的蒸蒸日上，在日常工作中，她們作為普通員工沒有驚天動地的壯舉，工作也都是點點滴滴，卻無處不體現著平凡而閃光之處，在干練而和善的外表下人人都有一顆積極進取和勇于奉獻的心---愛崗敬業為國壽,爭優創先鑄輝煌。

我在國壽分公司工作二十二年，國壽巾幗女職工們干一行愛一行、吃苦耐勞、愛崗敬業的精神，深深感染著我。就拿我們國壽的柜面之星張志麗來說吧，工作好幾年，經驗豐富，屢受客戶的好評。當大家夸獎她時，她總是謙虛地說：“過獎了，要做好服務，使客戶滿意還要努力。”她這么說，也這么做。一有空總是學習，學習各種知識，學習說話，做到音準字美。是啊，柜面工作就是要服務好客戶，要有豐富淵博的知識回答客戶的各種提問，要回答如流，讓客戶放心滿意；說話溫柔情真意切，讓客戶感到親切愉悅。真誠服務是我們工作的出發點和歸宿，所有的客戶都是我們的上帝。我們要做到用心服務，微笑服務。用心服務就是要求我們用自己的思想，用自己的知識，用自己的技能，全心全意，毫無保留地服務好客戶的所有要求。微笑服務就是要求我們用自己的聲音，用自己的情感，贏得客戶心。我們要用真誠服務贏得客戶，為公司創造效益，也為我們自己釀造甜蜜的生活。

隨手翻開國壽女同志們的工作筆記，只見上面密密麻麻地記錄著客戶的具體情況。星期天，本來我們可以陪著家人，孩子度過快樂的時光，可是我們知道客戶更需要我們。我們去看望他們帶去的不只是去收取保費，更重要的是他們需要的保障。我記得，曾經這樣說，“作為一名國壽職工能給別人送去保障，我覺得我們的付出真的很值了！”是啊，還有什么比這重要呢？

創先爭優的力量來自大家的相互扶持、相互協作。當一位女同志生了病，這時，其他幾名女同志會主動承擔起她的工作，甚至得知有同事生病后，輪換休息的同事們也紛紛主動打電話回單位要求繼續工作……她們全身心撲在工作上卻顧不了自己的小家，有的女同志孩子還小需要照顧，她們把自己家庭的事情全部交親人代管。每次完成一項任務，國壽的巾幗姐妹們都更加的努力，更加的團結，因為，在她們的心中都有一個堅不可摧的信念---眾志成城，創先爭優。

從我們中國人壽發展現狀來看，國壽女職工最需要的就是大無畏的挑戰精神與爭先創優的氣魄，胸懷目標、矢志不移的堅定信念，無所畏懼、勇往直前的工作態度，心系國壽、患難與共的愛崗敬業情懷。為著爭先創優，讓我們放下心中的等待和彷徨,讓我們在體會愛崗敬業的潮涌中全身心地投入到中國人壽事業中去，讓我們學習那些曾經的愛崗巾幗楷模并記錄在心間，作為我們勵志奮斗的坐標,伴隨著我們去實現心中那份平凡而偉大的理想。

中國人壽帶給了我們不同于眾的人生，經歷了不同的工作崗位，對工作的感悟也就更加深厚。也許生活的意義，不僅僅是為了生存，而是給個人的生活賦予意義，給自己的生命賦予光彩。十五年前，我們的職業生涯面臨著新的選擇，新的崗位、新的環境，一切對我們來說都是陌生的，同時又是充滿挑戰的。在我們努力學習、不斷提升自我的同時，也深深體會到了工作的壓力和艱辛，但是身邊姐妹門的互相鼓勵和互相幫助,讓我們變得更加堅強；我們明白，這種工作閱歷帶來的人生財富是無法用金錢來衡量的。坦然地接受工作帶給我們的一切，除了益處和快樂，還有艱辛和忍耐---這就是工作的意義……中國人壽帶給了我們耕耘的艱辛和收獲的喜悅，使我們的人生更加豐富多彩，使我們在生活的歷練中變得更加成熟和睿智。面對收獲，面對成功，我們感受到了自身價值的實現；面對困難，面對壓抑和不愉快，我們感受到了成長的代價……

第6篇

“美是到處都有的。對于我們的眼睛，不是缺少美，而是缺少發現”。學會觀察社會、觀察生活、認識事物。

學生認識的不僅僅是課文中“九百”、“銀絲”、“斷掉”這樣的文字。教學過程中，通過聲音、影像等情景創設，置身絕壁，感悟臺階的漫長、陡峭、危險，人行尚且艱難，掃路人勞動環境的艱辛可想而知，崇敬、尊重、愛憐、心碎等復雜感情交織在一起，純潔而感傷的情感會在心中升起，凈化心靈，陶冶情操教學目標自然實現。

如果小學生的表達失去了心靈的自由和本真的情思，“立意”愈高，人格將會愈低。讓學生的表達反映自己的生活是天然合理的，也是最有教育意義的，最吸引人和感動人的，從根本上來說這樣的學生表達自然是健康的。

二、盡情傾吐，無拘無束

我一直堅持以“讓學生暢所欲言為本”，減少對學生的束縛，為學生的創造一個自由的空間，尊重學生的每次表達，利用一切機會欣賞課文，欣賞他人、欣賞自我，為他們提供一個自由感悟的舞臺。

課文中“一上一下一千八百多級。……游客們氣喘吁吁……望而卻步。”年過七旬的掃路人，在這樣環境中求生，還說“不累，不累”。難道他不想退休過上孫兒繞膝，安享晚年舒逸生活；學生們自己也在思考，他能享受退休工資嗎？有保險嗎？不是工人60歲就得退休嗎？他70多歲了還要在這么危險的環境中掃路，難道他不擔心自己生命安全嗎？他之所以說不累，是不是害怕領導認為他不能勝任，辭退他，反而失去生存的依靠？……學生把想說的話盡情傾吐，極大限度地激發學生說的積極性，既培養學生的情商，又為學生寫作積累情感基礎，是語文教學生活化、時代化、直觀化的一條可行之路。

三、感悟人生，凈化心靈

生活處處是文章，事事練達皆學問。在情景創設教學中，有的學生接受能力強，表達水平提高比較快，有的學生表達水平很難提高。如何令這部分學生由不會說到會說呢？成為我關注的問題。

課文說“天游峰是武夷山的第一險峰。”許多游客望而卻步，作者順著銀絲上了峰頂，心里正在得意之時，看見一位面色黝黑，瘦削的臉，身穿一套褪色的衣服，足蹬一雙棕色的運動鞋的老人，正借著淡淡的星光用一把竹掃帚淡然的清掃著路面。黑、瘦、衣服褪色、星光等文字告訴讀者，老人生活清苦，勞動時間特殊，要等游客下山才能清掃臺階，早上為新來的游客掃清路面，晚上打掃上山游客留下的垃圾，他工作平凡，心靈高尚；他不辭辛勞，無怨無悔；如果游客人人愛護環境，不僅是對老人的幫助，也是在幫助游客自己，凈化游客的心靈。學生們暢談自己感受，聯系身邊的大事小事，氣氛活躍，好不熱鬧！

打開心靈的窗戶，真情地感悟人生的甘甜與辛酸！成就他們的人生，育人的功能得到發揮。

四、深層感悟，以悟促說

說出心理真實感悟是教改探索的一種境界。課文中，老人悠然地說：“我早該退休了。可我實在離不開這里……有花鳥作伴，我能舍得走嗎？”。學生感悟到老人豁達、自信、悠然；也感悟到老人艱難、辛酸、無奈；許多人感悟到老人崇高、無私、奉獻！

讀罷此文，縱使你真產生“辛酸”的感悟，也不能證明老人掃路生活辛酸。現實生活中許多老人以助人為樂，不計報酬，他們的胸懷與情操不是我們一把人能感悟透的！

第7篇

閱讀下面的文字，根據要求作文。

2008年3月31日，中央電視臺《藝術人生》劇組來到泰山錄制“清明特別節目”。結束時，特約嘉賓，北京師范大學教授于丹發表登山感悟：山登絕頂我為峰。這不僅是登山的境界，也應該是每個人的豪邁氣概。另一位特約嘉賓，《百家講壇》評《三國》的主講易中天的感悟則是：人生就像登山，不一定每個人都能爬到山頂，但爬了就好；不一定每個人都要登到山頂，但一定要一步一個腳印。

要求全面理解材料，但可以選擇一個側面、一個角度構思作文。自主確定立意，確定文體，確定標題，不少于800字；不要脫離材料的含意作文，不要套作，不得抄襲。

寫作指導

我們對這則材料的審題可以有如下的立意：

于丹的角度：①勇攀高峰，志存高遠 ②要有奮勇爭先的豪邁氣概 ③爭強好勝，永不服輸 ④勇立潮頭，做社會的變革者 ⑤成功屬于不屈不撓者

易中天的角度：①做任何事情都重在參與②走好人生的每一步 ③力所能及了無遺憾 ④量力而行，盡力就可 ⑤享受過程，別有洞天

“橫看成嶺側成峰，遠近高低各不同。”材料的意義多了，確定自己的觀點時，一定要注意找出一個對自己寫作有利的角度去寫。也就是說作者在選擇最佳切入點時，既要考慮最佳角度，也要考慮最適合自己展開的角度，即別人少有顧及的意向而自己卻感悟最深、有話可說且能把話說好的角度。

另外，寫作時，為了保險，最好能引用材料中和你的角度、觀點相關的句子加以分析、假設，這樣立論就扣住了“不要脫離材料的含意作文”的要求。觀點有出處，有來由，言之有理，容易得到閱卷人的認可，否則極易被判為偏題。準確理解材料的含意，根據自己的知識儲備、生活經歷和思想認識選定作文中心（選取材料中的一個“意義點”），即可構思作文。

例文展示

參與，就是好的

♥黃靈

參與了挑戰，才能證明自己；

參與了奮斗，才能領悟快樂；

參與了……

顧拜旦曾對奧運大家庭寫下這樣一句話：參與，就是好的。易中天也曾感悟：人生就像登山，不一定每個人都能爬到山頂，但爬了就好。顧拜旦的話和易中天的感悟，都說明了同一個道理：做任何事都重在參與。參與，就是好的。

參與也能證明自己

誰說一定要成功才能證明實力，誰說一定要獲得金牌才能證明自己？一位年近40歲的短跑女將從未獲得奧運金牌，但她已參與了五屆奧運會，當她站在年輕人中間時，格外搶眼，她頑強拼搏，敢于挑戰并享受著參與奧運會的快樂，贏得了眾人的喝彩。

沒有金牌的光芒，沒有奏響的國歌，但她的參與精神已然引起關注；沒有頂尖的成績，沒有年輕的實力，但她的參與精神足以贏得掌聲！參與就是好的，一樣能證明自己。

參與也能領略快樂

前兩屆CCTV模特大賽，出現了一位媽媽級參賽選手。為了豐富自己的生活，她走上了舞臺，因年齡的原因，她自然比不過年輕貌美的其他選手，但是她在參與的比賽中，都能自信、微笑地走臺，感受著參與的快樂。被淘汰時，她說：“我的過程是在探索，參加比賽就是重在參與，參與了就是最棒的，我很快樂，收獲到了很多東西。

……

參與也能收獲經驗

北京奧運會開幕之后的第一個比賽日，浙江小將孫揚站在了“水立方”的賽場上，開始了他奧運會的“處子秀”。 對于今年才16歲的孫揚，畢竟大賽經驗還非常缺乏，小組預賽結果，孫揚3分50秒90，小組排名第七。盡管無緣決賽，但作為年輕的潛力選手，能參加奧運會，對他，已經是一種成功。這次參賽經歷將讓孫揚收獲了寶貴的經驗。

他的教練婁紅梅說：“這次奧運會，對孫揚是一種成長和鍛煉，會讓他收獲一些大賽的經驗，逐步成熟起來。”婁紅梅對這位弟子充滿了信心，相信他通過這次經驗的積累，在今后的比賽中，會有更好的發揮。

參與能證明自己，感悟激情，領略快樂，收獲經驗，它將成為我們一生的財富，美好的回憶。

可以說，爬上山頂是強者，但未登頂的也不意味著失敗。登山，注重的是登山的過程，登山的樂趣在于參與其中所領略的沿途風景，所付出的努力，收獲的快樂。

參與，讓我們成為了風景中的一部分；參與，讓我們創造了快樂的過程。

參與，就是好的！

第8篇

1 激勵學生自己學數學

現代心理學研究表明：任何學習都是學習者自主建構的過程 。在這個過程中，離不開學習主體與文本之間的交互作用。有意義的接受學習是自主建構。有意義的發現學習也是自主建構。在學習過程中，既沒有絕對的接受學習，也沒有絕對的發現學習，總是兩者相互交替，有機結合的。在這個過程中，建構主義強調學習者主動接觸外界的信息（包括課本），并用自己已有的知識與經驗去解讀這些信息，從而賦予認識對象以心理意義，如講平方差公式時，先在屏幕上打出： ① （1+2x）（1-2x） ② （2a+3）（2a-3） ③ （100+1）（100-1） ④ （x+3）（x-3）讓學生比賽計算，看誰做得又快又好，并且讓學生自己找找看看，存在什么規律，當你找到規律時，"平方差公式"就找到了。（學生個別學習3分鐘）。接下來，分組討論交流想法。得出結論：（a+b）（a-b）=a2-b2。在交流的過程中時中，學生交流的不僅僅是知識，同時還包含方法方面的交流，情感態度價值方面的交流，并且記錄下自己的設想。這種交流達到了更大范圍的資料整合。這樣，在教學中學生做到手到、眼到、口到、心到，學會了認真看書、仔細觀察、用心思考、用心體會的好習慣，真正學會"讀"數學書。

2 激發學生"用數學"

新課程提倡學生初步學會從數學的角度提出問題，理解問題，并能綜合應用所學的知識技能解決問題的發展應用意識。隨著社會主義市場經濟體制的逐步形成。股票、利息、保險、分期付款等經濟方面的數學問題，已日漸成為人們的常識。因此數學教學不能視而不見，不管實際應用，這樣恐怕就太不合時宜了。

學生學習知識是為了用知識。但長期的應試教育使大多數學生不知道為什么學數學，學數學有什么用。因此，在教學時，我針對學生的年齡特點、心理特征，密切聯系學生的生活實際，精心創設情境，讓學生在實際生活中運用數學知識，切實提高學生解決實際問題的能力。如在講"圓周角定理推廣的應用"時，首先創設情境"老奶奶不慎把一個圓形的玻璃鏡子掉在地上，打成了不易帶走的幾塊碎片，老奶奶很著急。你能想辦法幫助她嗎？把碎片重新拼成新的圓形的鏡子嗎？你能用學過的數學知識解決這個問題嗎？"――"破鏡重圓"是生活中很實在的問題，老師引導學生把課堂所學的知識和方法，運用到生活實際中，鼓勵學生把生活中碰到的實際問題帶到課堂，嘗試著用數學方法解決，并注重解決問題策略的多樣性，這既有利于挖掘學生的潛力，又有利于培養學生初步創新能力。經常這樣訓練，使學生深刻地認識到數學對于我們的生活有多么重要，學數學的價值有多大，從而激發了他們學好數學的強烈欲望，變"學數學"為"用數學"。

2 引導學生感受體驗數學

尊重學生的不同感受及其思考的方向，引導學生主動地富有個性地學習。如在學習"函數"時，我首先舉出生活中函數關系的例子，引導學生感受生活當中的變量及變量之間的關系。對于變量，每個學生的感受是不同的。因此學生舉出很多生活中的變量的例子。

第9篇

剛剛把郭初陽老師的《一個獨立老師的語文之旅》看完了，合上書，感覺是一種幸福和一種幸運——能夠安靜的讀書，能夠讀到這樣好的書，遇見這樣好的思想。

對于當前的教育體制，中小學教材，郭初陽老師有很多的批判，顯然非常的沉重，這個體制，體制內的很多措施，比如教材的選擇，時間的規定，教師的教法，很多都在侵蝕著學生們，這無疑是讓人心憂痛心的。但是不知是他的書即使全是批判但仍有希望的緣故，還是我習慣從樂觀的角度去考慮問題的緣故。我并沒有感到特別的痛苦。反而增了一些希望與信心。

誠然，這個教育體制有很多的弊病，需要變革，但如何不變革呢？身為一個小小語文老師的我，無法去改變，那么我能做什么，讓學生們少受這個體制的殘害呢？這是我要思考的。

比如，我們無法選擇使用哪種教材，但我們可以改變怎么去教，可以在有限的權力與范圍內選擇更多更好的文章或者說教材內容讓我們的學生品悟（即我們可以用批判的眼光去看待文本，用淵博的知識去篩選文本），可以用更科學更合理的方式去教授。我們可以讓學生不僅接觸教材，他們可以接觸更多，只要我們努力。總之，我們可以盡己所能，去改變我們能改變的。這是我的感悟。

這段時間在一直在看書，看了書之后就想寫點東西，表達我的感悟，感想。雖然文筆不好，感悟不深，甚至頗多錯誤，但是寫的沖動卻是實實在在的。這使我發現，我們的學生為什么覺得寫作文是最痛苦的事，為什么寫的東西感覺是干巴巴的拼湊呢，我想，關鍵是他們沒有閱讀，因為閱讀與寫作是相輔相成的啊，離開了閱讀，寫作只是一潭死水。正如朱熹先生所說，"問渠那得清如許，為有源頭活水來。"所以要想提高學生的寫作能力，唯有讓他們多閱讀，然后才能發于聲。

書讀完了，權且書摘一些吧。

1. 倘若中小學時期，就能有科學的方式來談論這個重大的話題（指死亡教育），輔以一些優秀的文本，比如圖畫書《爺爺的天使》小說《馬提與祖父》等等，那該多好，因為死亡教育猶如一支小小的疫苗，能極大地增強生命體的抵抗力。

2. 死亡教育，繃緊了生命之弦，讓人懂得珍惜生命中的每一天，努力尋找自己一生的意義。

3. 死亡教育的內容：生命歷程；生命與死亡的意義；死亡主題的音樂、文學、繪畫等藝術鑒賞；自殺及其預防；如何面對親屬或朋友的死亡；喪葬文化；保險與遺囑等。可以采用案例、影片、文學作品等。如《死亡的新意義》，菲費爾

4. 一定要打開視野，營造盡可能開放的課堂，將盡可能多的資料納入課堂。文本是開放的，文學、電影、音樂、動畫以及生活中正在發生的事件……形式上也是開放的，傳授、講座、觀摩、閱讀、商議、辯論、話劇、社會調查實踐……在這個過程中，教師不要輕易發表自己的觀點，尤其要克制自己，不要將陳舊而不自知的觀點，灌輸給了孩子，應該讓他們在各種觀點的透明羅列中，自由選擇屬于他們自己的觀點。

5. 教師要打開自己，保持心靈的開放，用自己真實的生活與真切的思考，與孩子們建立聯系，在完整而不分裂的自我中，編織一張有凝聚力量的網。在他的課堂中，沒有人擁有絕對的真理，而每個人都有要求被理解的權力，每個人的生活經歷的每個重要線索都得到尊重。

6. 生活與文學有著各自的原則：生活要盡量計算成本與收益，堅持精力節省原則；文學要盡量使人恢復對生活的敏感，"使石頭顯出石頭的質感",堅持陌生化原則。兩條原則，前者要求節約時間、創造財富，后者要求延長時間、醒覺生命。——我的理解：文學源于生活，但又讓人高于生活。

7. 藝術真實，并不是等于低級的準確，藝術有屬于自己的內在真實；只滿足與形似到亂真，拘泥于無足道的細節表現的畫家，將永遠不能成為大師。……優秀的藝術家，有的是持久、深入、廣泛的觀察——加倍的觀察。

8. "我的時間":我在一個巨大而透明的容器里面，想拔腿逃跑，腳已被埋住。 事實上，沙已沒到腰部了，只能動彈不得地看著它一點點往上漲。 更多的沙從上面撒下來，抬頭看，依稀可見一只灰黑色的瘦骨嶙峋的手掌，就是從它的指縫里，不斷有沙子密密地降下。只要屏住呼吸，就能聽到這細雨般微弱的沙沙聲。 我還有多少時間。

9. 飲著狂泉（飲了此水，無不狂）長大的搖身為教師的我們，是否正暗藏著火艾針藥，聚謀共執我們的孩子，對他進行著痛苦的治療呢？這是我們無可補救的罪。

10. 我們過去的日子并非空虛，我們的日子像白米，每粒都是艱難，然而粒粒充實飽滿。

11. 我們應當知道，再偉大的教師也不過是人，要自知己身的限度，圣女小德蘭自比為一朵小百花，特蕾莎嬤嬤說自己只是一支鉛筆。跌倒后又站起、破碎了方愈合、心里作難的教師，深知三折肱為良醫的道理，帶著自己的傷痕，來更溫柔地幫助那未成年的孩子們。