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發(fā)聲亮劍發(fā)言稿優(yōu)選九篇

時(shí)間:2022-03-12 23:10:38

引言:易發(fā)表網(wǎng)憑借豐富的文秘實(shí)踐,為您精心挑選了九篇發(fā)聲亮劍發(fā)言稿范例。如需獲取更多原創(chuàng)內(nèi)容,可隨時(shí)聯(lián)系我們的客服老師。

第1篇

大家好!

我叫***,是**市第*中學(xué)的一名普通學(xué)生。我今天發(fā)言的題目是《入校兩年所見(jiàn)所感》

來(lái)到九中已近兩年,在這如家般溫暖的校園里,我有無(wú)數(shù)所見(jiàn)所聞、所思所想,借今天這個(gè)機(jī)會(huì),一并傾吐給大家。

小學(xué)時(shí)我就聽(tīng)說(shuō),**是一個(gè)輕松無(wú)比的快樂(lè)天堂,不但有驛城區(qū)一流的“陽(yáng)光大課間”活動(dòng),并且老師上課使用的是小組合作的快樂(lè)課堂模式。另外還有課前唱誦、主題班會(huì)、專題講座、讀書(shū)活動(dòng)等豐富多彩的課外活動(dòng),于是我下定決心一定要到**來(lái),感受一下快樂(lè)學(xué)習(xí)的味道。在那個(gè)金色的充滿詩(shī)情畫(huà)意的九月,我如愿來(lái)到這所令我朝思暮想的學(xué)校。

當(dāng)我第一次走入校園,就有許多事令我感到十分地新奇:

***校長(zhǎng)親自站在校門口,微笑著歡迎同學(xué)們到來(lái)。每一個(gè)學(xué)生都會(huì)走上前去與他問(wèn)好,他也會(huì)親切地加以回復(fù)。瞬間,我對(duì)新學(xué)校,新環(huán)境的忐忑、緊張一掃而空。

第一次進(jìn)教室,我不僅驚異于它的窗明幾凈,整齊有序,更驚異于教室四壁那豐富多彩的班級(jí)文化和精致的小小圖書(shū)角。這里的老師更是令我印象深刻。老師們知識(shí)淵博,功底深厚,授課時(shí)滿懷激情。他們不僅將課本內(nèi)容講明講清,還拓展延伸了許多課本上沒(méi)有的知識(shí)。每一節(jié)課聽(tīng)完,都令我收獲頗豐。我們老師還特別的會(huì)制造浪漫溫馨的氛圍,開(kāi)學(xué)不久,我們的老班就統(tǒng)計(jì)了我們的生日,我們生日當(dāng)天,老班會(huì)給我們一個(gè)個(gè)意外的驚喜,給我們擁抱,給我們祝福,還讓全班同學(xué)給我們送上一首熱情洋溢的生日贊歌,我們總是被著暖暖的,溫馨的快樂(lè)包圍著!

總之,初入校園的我感受就是:來(lái)這所學(xué)校,真的來(lái)對(duì)了,這就是我夢(mèng)想的學(xué)校啊!

過(guò)去,我聽(tīng)說(shuō)過(guò)*中的“陽(yáng)光大課間”,但是從沒(méi)見(jiàn)過(guò),入校不久我有幸親自體驗(yàn)了這項(xiàng)有趣的健身活動(dòng)。我校的陽(yáng)光大課間活動(dòng)主要包括“少年韻律操和花樣跑操”兩大項(xiàng)。其中“少年韻律操”吸收了傳統(tǒng)廣播操、藝術(shù)體操、現(xiàn)代舞、流行音樂(lè)、說(shuō)唱藝術(shù)等諸多元素。她形式新穎,節(jié)奏明快,動(dòng)作舒展,可謂是一項(xiàng)融“體操”、“舞蹈”、“音樂(lè)”為一體的別樣的體育項(xiàng)目。我懷著新鮮和好奇在老師的教授下慢慢地掌握了動(dòng)作要領(lǐng)。回家后,我試著跳給媽媽看,媽媽高興地說(shuō);“你們的廣播操,像舞蹈又像體操,可真是太有趣啦!”

我們的“花樣跑操“更有趣了!因?yàn)槲覀兣艿氖恰皫缀螆D案”,因此,無(wú)論跑多久,都不會(huì)感覺(jué)累。所謂的“幾何圖案”就是在各班列隊(duì)跑步時(shí),隊(duì)列和隊(duì)形不斷變換組合成各種各樣的動(dòng)態(tài)幾何圖形。它涵蓋了隊(duì)列、隊(duì)形中的繞場(chǎng)行進(jìn)、錯(cuò)肩行進(jìn),方形行進(jìn)以及并隊(duì)列隊(duì)等內(nèi)容。“花樣跑操”要求所有班級(jí)方陣,在隊(duì)列隊(duì)形變換中要有高度的組織性、紀(jì)律性、集體意識(shí)和協(xié)助意識(shí)。如今我們能夠順利地變換出各種圖案的花樣跑操,這飽含了我們?nèi)w師生多少辛勤的汗水和努力呀!

在小學(xué)我們聽(tīng)到預(yù)備鈴聲響時(shí),就安靜下來(lái),等待著上課。但在九中就不同了,九月一日是正式開(kāi)學(xué)的第一天,預(yù)備鈴聲一落,老師就要求我們?nèi)w起立,小手背后,齊聲高歌,這就是我們九中獨(dú)具特色的“課前唱誦”活動(dòng)。課前唱誦讓我們?cè)诩で閵^進(jìn)的歌聲中快速排除不利于課堂學(xué)習(xí)的雜亂情緒,以飽滿的激情投入課堂。它不僅提高課堂學(xué)習(xí)效率,還能夠讓同學(xué)在優(yōu)美的樂(lè)聲中陶冶情操,真是一舉多得啊!

我還想給大家介紹我們的主題班會(huì),你可別小瞧我們的主題班會(huì),在我們學(xué)校,每周一次的班會(huì)活動(dòng),一月一主題,一周一標(biāo)題。學(xué)校為了從不同角度,不同方面,不同層次的培養(yǎng)我們的人生觀和價(jià)值觀,團(tuán)委和政教處特別針對(duì)不同年級(jí)設(shè)置不同主題,比如七年級(jí)以“養(yǎng)成教育”為主題,以培養(yǎng)新同學(xué)的習(xí)慣養(yǎng)成;、八年級(jí)以“感恩教育”為主題,對(duì)中學(xué)生進(jìn)行情感素質(zhì)的提高;九年級(jí)以“成功教育”為主題,激勵(lì)學(xué)生努力學(xué)習(xí)在中考時(shí)一展風(fēng)采。學(xué)校還把“安全教育”貫穿始終,來(lái)提醒學(xué)生安全警鐘長(zhǎng)鳴!更有趣的是,每周的主題班會(huì),團(tuán)委和政教處都會(huì)組織學(xué)生會(huì)干部觀摩評(píng)比,讓各個(gè)班相互學(xué)習(xí),彼此取長(zhǎng)補(bǔ)短,以此促進(jìn)學(xué)校主題班會(huì)質(zhì)量的整體提高!

學(xué)校經(jīng)常邀請(qǐng)各方面專家開(kāi)展講座,使我們學(xué)到了許多有趣的知識(shí)。,我已聆聽(tīng)了十余位專家和老師的講座。像安全方面的講座,學(xué)校每學(xué)期還邀請(qǐng)公安局及法院的領(lǐng)導(dǎo)為我們師生上法制安全教育課。讓我懂得許多安全常識(shí),教會(huì)了我們應(yīng)該怎樣保護(hù)自己。另外,我們還有“健康教育講座”,我記得那次主講是我校團(tuán)委書(shū)記盧老師,她的講座生動(dòng)有趣,剛開(kāi)始我還有點(diǎn)臉紅,但是,當(dāng)盧老師講完后,我不僅學(xué)到了許多生理和心理知識(shí),并且還突然間覺(jué)得自己長(zhǎng)大了。

再介紹一下我們的書(shū)香校園吧!我們學(xué)校不僅有“圖書(shū)館”,我們還把圖書(shū)“搬入”教室中來(lái),讓每個(gè)班級(jí)都設(shè)立了圖書(shū)角,方便同學(xué)們閱讀。而這足夠人手一本甚至多本的圖書(shū)則是學(xué)校根據(jù)青少年的特點(diǎn)精心為各個(gè)班級(jí)購(gòu)買的。我們的圖書(shū)類型非常豐富,每一個(gè)同學(xué)都能找到自己喜愛(ài)的圖書(shū)。在下課時(shí)間,追逐打鬧的現(xiàn)象不見(jiàn)了,而圖書(shū)角擠滿了一個(gè)個(gè)渴望知識(shí)的同學(xué),我們學(xué)校真的可以說(shuō)是書(shū)香四溢了。

最令人嘖嘖稱奇的是我們的高效課堂。在我們學(xué)校,課堂有時(shí)候不是老師說(shuō)了算,而是由同學(xué)們做主。我們的老師改變了傳統(tǒng)的“老師講學(xué)生聽(tīng)”的教學(xué)方式,把課堂還交了學(xué)生。老師在課堂上開(kāi)展小組競(jìng)賽,討論會(huì)、辯論會(huì),調(diào)動(dòng)每一個(gè)同學(xué)的積極性,讓每個(gè)同學(xué)都能參與其中,我還被選為本小組的英語(yǔ)組長(zhǎng)。在英語(yǔ)課上我?guī)ьI(lǐng)我們的合作小組與其他小組比賽時(shí),還多次獲得老師的表?yè)P(yáng)呢。課堂上,我們的老師有時(shí)候還隱退二線——請(qǐng)一位或幾位同學(xué)走上講臺(tái),客串老師為同學(xué)們講課。我就多次嘗試過(guò)做小老師的感覺(jué)。記得第一次走上講臺(tái)的我心中非常緊張,吞吞吐吐話都講不清楚,幸好在臺(tái)下聽(tīng)課的老師不斷投來(lái)鼓勵(lì)的目光,我才勉強(qiáng)把課講完。課后,老師指出了我講課的不足之處,如語(yǔ)速忽快忽慢、知識(shí)點(diǎn)講解太慢,板書(shū)時(shí)遮擋臺(tái)下同學(xué)視線等等。我一一牢記心里,力爭(zhēng)下次改正。隨著我一次次走上講臺(tái),我逐漸適應(yīng)了站在臺(tái)上被臺(tái)下同學(xué)盯著的感覺(jué),開(kāi)始能在講臺(tái)上有條不紊地講述。此時(shí),我真像小老師一樣!我還獲得過(guò)校級(jí)“明星組長(zhǎng)”的光榮稱號(hào),不信你看,學(xué)校宣傳欄里還有我的名字呢!

不瞞您說(shuō),我與大多數(shù)人一樣,對(duì)**的第一印象是小。確實(shí),她是一個(gè)占地不足20畝狹小空間。但我覺(jué)得我們的校園卻是個(gè)“小而精、美爾雅”的快樂(lè)家園。走進(jìn)校園您首先看到的是一塊巨大的花崗巖,巖壁上鐫刻“快樂(lè)、勤奮、感恩、成長(zhǎng)”,這可是我們的校訓(xùn)哦!能把“快樂(lè)”放在第一位,這就是我們學(xué)校的教育理念和辦學(xué)特色。我們的教學(xué)樓與科技樓東西相望,中間是綠樹(shù)環(huán)抱的彩色的塑膠操場(chǎng),操場(chǎng)幾乎占學(xué)校面積的三分之二。一個(gè)學(xué)校極力開(kāi)發(fā)有限空間,盡可能地為學(xué)生提供娛樂(lè)和體育活動(dòng)場(chǎng)地,這不正是對(duì)“快樂(lè)”二字的最佳詮釋嗎?

我們的校領(lǐng)導(dǎo),以慈父般的博懷關(guān)照我們成長(zhǎng);我們的老師,學(xué)識(shí)廣博,功底深厚,將我們引入一個(gè)個(gè)知識(shí)殿堂,我們自己也正耳濡目染擁有博大的胸襟。所以我說(shuō),**太大了,正像那句話說(shuō)得一樣:“心有多大,舞臺(tái)便有多大!”我們**人心胸開(kāi)闊,以曠達(dá)情懷創(chuàng)建了一個(gè)快樂(lè)學(xué)習(xí)的廣闊天地。

第2篇

【關(guān)鍵詞】空間插值;降雨量;地形高程

0.前言

降雨量空間插值方法通常有兩類:一個(gè)是簡(jiǎn)化方法;另一個(gè)是擴(kuò)展方法。簡(jiǎn)化方法簡(jiǎn)化了時(shí)空插值問(wèn)題,變?yōu)閱渭兊目臻g插值問(wèn)題。首先,對(duì)每一個(gè)樣本點(diǎn),應(yīng)用時(shí)間函數(shù)分別在時(shí)間尺度上進(jìn)行插值,其次,應(yīng)用空間函數(shù)在空間尺度范圍進(jìn)行插值,就可以得到時(shí)空插值結(jié)果。擴(kuò)展方法同時(shí)考慮時(shí)間維與空間維,因此將時(shí)空插值問(wèn)題拓展為高維空間插值問(wèn)題。通過(guò)對(duì)云南省年均降雨量的空間分布特征進(jìn)行研究,采用合適的方法進(jìn)行對(duì)插值結(jié)果作驗(yàn)證分析,能夠?yàn)樵颇鲜〉刭|(zhì)災(zāi)害評(píng)估提供借鑒。

1.常用插值方法

1.1線性插值

首先是不規(guī)則采樣點(diǎn)的插值。常用三角剖分線性插值法把數(shù)據(jù)點(diǎn)用線相連,在平面中形成許多三角形,并滿足三角形間互不穿切。這樣,整個(gè)空間場(chǎng)就可以看成由這些小三角平面構(gòu)成,每個(gè)三角形的頂點(diǎn)都被樣品點(diǎn)所代替,插值時(shí)將落在小三角形平面投影中的網(wǎng)格點(diǎn)用三角平面的值來(lái)代替。這種方法是精確插值,較為忠實(shí)原始數(shù)據(jù)點(diǎn)。但是,此法涉及三角剖分、平面擬合以及投點(diǎn)等幾個(gè)步驟,因此計(jì)算量很大。

對(duì)于山區(qū)或者降水站點(diǎn)不是很密集的地區(qū),距離反比加權(quán)法有助于提高所預(yù)測(cè)數(shù)據(jù)的精度。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是,可以通過(guò)權(quán)重調(diào)整空間插值等值線的結(jié)構(gòu),缺點(diǎn)是該方法也沒(méi)有考慮地形因素(如高程等)對(duì)降水的影響。

1.3普通克里金法

克里金插值方法是建立在地質(zhì)統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)上的一種插值方法。該方法最早由法國(guó)地理學(xué)家Matheron和南非礦山工程師Krige提出,并用于礦山勘探。這種方法充分吸收了地理統(tǒng)計(jì)的思想,認(rèn)為任何在空間連續(xù)變化的屬性是非常不規(guī)則的,不能用簡(jiǎn)單的平滑函數(shù)進(jìn)行模擬,只可以用隨機(jī)表面函數(shù)給予恰當(dāng)描述。克里金插值方法的關(guān)鍵在于權(quán)重系數(shù)的確定,在插值過(guò)程中根據(jù)某種優(yōu)化準(zhǔn)則函數(shù)來(lái)動(dòng)態(tài)地決定變量的數(shù)值,從而使內(nèi)插函數(shù)處于最佳狀態(tài)。克里金插值方法包括普通克里金插值方法、泛克里金插值方法及協(xié)克里金插值方法等,最常用的是普通克里金插值方法。普通克里金插值方法認(rèn)為,當(dāng)空間變量的結(jié)構(gòu)性成分確定后,剩余的差異變化屬于同質(zhì)變化,不同位置之間的差異僅是距離的函數(shù)[3]。普通克里金法在克里金大家族中是使用最廣泛的一種方法。它既可以對(duì)點(diǎn)進(jìn)行估算,也可以對(duì)塊進(jìn)行估算,可以被表示為:

2.基于地形高程的云南省降雨量空間插值比較

2.1參證站的選擇

在站點(diǎn)選擇上(圖5),首先考慮離待估站點(diǎn)距離小于D范圍內(nèi),離待估站點(diǎn)距離最近的站點(diǎn);其次,所選擇的站點(diǎn)構(gòu)成的多邊形盡量把待估站點(diǎn)包含在里面,即內(nèi)插優(yōu)先原則。設(shè)參證站點(diǎn)數(shù)大于等于3,若小于3個(gè)站點(diǎn)時(shí)直接取最近站點(diǎn)進(jìn)行插值。當(dāng)待插值點(diǎn)M和距離待估站點(diǎn)最近的兩個(gè)站點(diǎn)A與B的位置固定的時(shí)候,第3個(gè)站點(diǎn)C的位置與M,A,B3個(gè)站點(diǎn)的平面圖形有如圖5(b)、圖5(c)、圖5(d)和圖5(e)所示,共4種情況。當(dāng)C站位于Ⅰ區(qū)時(shí)候,構(gòu)成的三角形為圖5(b);當(dāng)C站位于Ⅱ或Ⅳ區(qū)時(shí)候,構(gòu)成的三角形為圖5(c)。當(dāng)C站位于Ⅲ區(qū)時(shí)候(這種情況不可能出現(xiàn),因?yàn)椴粷M足最初限定條件),構(gòu)成的三角形為圖5(d)。當(dāng)C站位于V區(qū)時(shí)候,構(gòu)成的三角形為圖5(e),則都有S

2.2三種插值方法的比較

主要選取云南省兩個(gè)流域的雨量站網(wǎng)為實(shí)驗(yàn)研究區(qū),流域內(nèi)有201個(gè)雨量站。將流域按高程和子流域劃分為三個(gè)地區(qū):兩個(gè)高程起伏區(qū)、一個(gè)平原區(qū)。每個(gè)區(qū)內(nèi)選取3個(gè)參證站點(diǎn)進(jìn)行交叉驗(yàn)證。由于站點(diǎn)的屬性數(shù)據(jù)和氣象數(shù)據(jù)是實(shí)地獲取的,故PRISM中內(nèi)插精度受權(quán)重因子影響。采用參證站與每個(gè)待估點(diǎn)地理坐標(biāo)的歐氏距離。不同坡度地表接收到的太陽(yáng)輻射相差很大,對(duì)太陽(yáng)輻射的吸收、輻射、反射也不同。坡度被分為0°~30°、30°~60°、60°~90°,3個(gè)區(qū)間加以量化,以確定站點(diǎn)的權(quán)重a。地表坡向也是對(duì)氣象要素有很大影響的因子之一,坡向的不同會(huì)引起背風(fēng)坡和向風(fēng)坡氣流的空間差異,從而引起不同的坡向降水量。本文地表按順時(shí)針?lè)较蚍譃?個(gè)坡向區(qū)間(每個(gè)區(qū)間所跨角度為45。),通過(guò)坡向區(qū)間的劃分來(lái)表示不同站點(diǎn)對(duì)待插站點(diǎn)氣象要素影響力的大小,由此以對(duì)流域降水的地理分布特征進(jìn)行研究。

3.結(jié)語(yǔ)

總的來(lái)說(shuō),云南,降雨強(qiáng)度由南向北、由東向西均呈現(xiàn)出先減小、后增大的趨勢(shì)。對(duì)每一個(gè)片區(qū)采用合適的插值方法,總的效果會(huì)更好些。當(dāng)插補(bǔ)應(yīng)用于水資源評(píng)價(jià)時(shí),時(shí)間步長(zhǎng)為周以上,對(duì)于降水量變化梯度不大的地區(qū),可以不考慮插值算法的選取,算法的精度相近。可以認(rèn)為,沒(méi)有絕對(duì)最優(yōu)的點(diǎn)雨量插值方法,必須對(duì)降雨數(shù)據(jù)進(jìn)行時(shí)空分析,根據(jù)雨量站點(diǎn)布設(shè)、雨量資料和地理位置等特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)牟逯邓惴ɑ蛩惴ńM合會(huì)取得較好的效果。 [科]

【參考文獻(xiàn)】

[1]甄計(jì)國(guó),陳全功,韓濤.甘肅省各流域降水量的GIS模塊插值估計(jì)與改進(jìn)[J].氣象科學(xué),2009,29(4):467-474.

第3篇

【摘要】 目的測(cè)定珍珠粉中的氨基酸含量。方法鄰苯二甲醛(OPA)柱前衍生反相高效液相色譜法,采用熒光檢測(cè),梯度洗脫。結(jié)果該法在28 min之內(nèi)分離出15種氨基酸。結(jié)論該法樣品用量少、靈敏度高、線性范圍寬、重現(xiàn)性好,適于分離大量樣品。

【關(guān)鍵詞】 高效液相色譜; 柱前衍生法; 氨基酸; 珍珠粉

Determination of the Contents of Amino Acids in Pearl Powder by RP-HPLC after Precolumn Derivation with OPhthaldialdehyde (OPA)

Abstract:ObjectiveIn this paper, we determined amino acids in pearl powder. Methods A manual pre-column derivation procedure has been developed by reversed-phase HPLC with O-phthalaldehyde and fluorescence detector. Results More than 15 amino acids were separated within 28 min. Conclusion The method is sensitive, precise and shows good repeatability.

Key words:Highperformance liquid chromatography; Precolumn derivation; Amino acids; Pearl powder

隨著生命科學(xué)和生物工程的發(fā)展,氨基酸作為組成生物大分子的基本單元,其分析方法受到重視。20世紀(jì)70年代以后,反相高效液相色譜技術(shù)在氨基酸分析中得到廣泛應(yīng)用,使分離時(shí)間縮短。而熒光柱前衍生技術(shù)的采用使檢測(cè)靈敏度提高了兩個(gè)數(shù)量級(jí),達(dá)到pmol級(jí)。常用的衍生方法有:DABS法(衍生劑為磺酰氯二甲胺偶氮苯DABSYLCl)、DNS法(衍生劑為丹酰氯DANSYLCl)、FMOC法(衍生劑為氯甲酸芴甲酯FMDCCl)、PITC法(衍生劑為異硫氰酸苯酯PITC)和OPA法(衍生劑為鄰苯二甲醛OPA)等[1,2]。前4種方法存在反應(yīng)活性差、速度慢、靈敏度低、反映試劑干擾等缺點(diǎn),而OPA法具有衍生步驟簡(jiǎn)單、反應(yīng)速度快、剩余試劑不干擾測(cè)定等優(yōu)點(diǎn),其應(yīng)用最為廣泛[3,4]。本文用Waters Pump515雙泵高效液相色譜儀,以O(shè)PA為衍生試劑,測(cè)定了珍珠粉中氨基酸的含量。該法操作簡(jiǎn)單,重現(xiàn)性好,適于分離大量樣品。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 Waters Pump515雙泵高效液相色譜儀,Waters MasslynxTM 3.5色譜管理系統(tǒng)(Waters, 美國(guó)),配島津RF10A熒光檢測(cè)器,AL204電子天平(上海梅特勒-托利多儀器有限公司)。

1.2 試劑 15種氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液:含每種氨基酸1.0 mg/ml,用氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品溶于0.1 mol/L鹽酸配制。OPA衍生試劑:取500 mg OPA和10 ml甲醇, 加入100 ml 0.4 mol/L硼酸鈉水液,用氫氧化鈉調(diào)pH值至10,最后加入400 μl的巰基乙醇,混勻,置4℃ 冰箱中保存。

15種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心購(gòu)得(中國(guó),北京);甲醇(色譜純)上海陸都化學(xué)試劑廠;鹽酸,氫氧化鈉,硼酸鈉,乙酸鈉,巰基乙醇均為分析純由上海三浦化工有限公司購(gòu)得。

2 方法與結(jié)果

2.1 工作條件色譜柱:RPC18色譜柱;流動(dòng)相A為0.05 mol/L醋酸鈉水液∶四氫呋喃∶甲醇=96∶2∶2(V∶V∶V)(%);流動(dòng)相B為甲醇:水=65∶35(V∶V)(%);梯度洗脫條件(見(jiàn)表1);進(jìn)樣前,柱子用流動(dòng)相A平衡10 min。熒光檢測(cè)器:發(fā)射波長(zhǎng) 338 nm,激發(fā)波長(zhǎng)430 nm。

2.2 衍生及分析分別取2 μl氨基酸的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品溶液和2 μl OPA衍生試劑,在注射器中來(lái)回抽取5次,混合均勻后 (定量環(huán)為20 μl) 直接注入高效液相色譜儀進(jìn)行分析,以保留時(shí)間定性,峰面積外標(biāo)法定量。

表1 梯度洗脫條件(略)

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 在0.05~100 mg/ml濃度范圍內(nèi),由6個(gè)濃度水平來(lái)繪制校正曲線。以峰面積為縱坐標(biāo),目標(biāo)物相應(yīng)的濃度為橫坐標(biāo)做校正曲線,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程。15種氨基酸峰面積和濃度之間的線性相關(guān)系數(shù)r值在0.921 5~0.999 5之間,色譜圖見(jiàn)圖1。

轉(zhuǎn)貼于

2.3.2 精密度試驗(yàn) 標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)5次進(jìn)樣,15種氨基酸的保留時(shí)間和峰面積的變異系數(shù)分別為0.09%~0.28%和0.8%~4.2 %。

2.3.3 重復(fù)性試驗(yàn) 取5份樣品依法進(jìn)行測(cè)定,日內(nèi)、日間變異系數(shù)均<7.5 %。

2.3.4 加樣回收率試驗(yàn) 3個(gè)空白樣品中添加低、中、高三個(gè)濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)品完成,通過(guò)對(duì)比檢測(cè)的量和實(shí)際加入的量來(lái)計(jì)算,結(jié)果平均回收率在85.2%~103.6 %之間。

2.4 樣品測(cè)定 本實(shí)驗(yàn)供試樣品為珍珠粉(15 g)在500 ml人工胃液溶液(10 mg/ml胃蛋白酶的水液,含1.64 % 稀鹽酸,37℃±0.5℃)中的溶出樣品,購(gòu)自市場(chǎng)。表2為某一時(shí)間內(nèi)NM組(納米粉體溶出量樣品)、CW組(超微粉體溶出量樣品)和 CG組(常規(guī)粉 體溶出量樣品)氨基酸的分析結(jié)果。珍珠粉中游離氨基酸的色譜圖見(jiàn)圖2。

表2 珍珠粉中各氨基酸的含量(略)

圖1 15種氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的HPLC圖(略)

圖2 珍珠粉中氨基酸的HPLC圖(略)

3 討論

為了保持OPA的穩(wěn)定性,必須每隔一天在1 ml OPA衍生劑中加2 μl巰基乙醇,來(lái)平衡巰基乙醇揮發(fā)帶來(lái)的損失。

最初2 min的流速為0 ml/min 是為了保證樣品與衍生劑的充分反應(yīng),本實(shí)驗(yàn)分別用過(guò)0.8,1.0,1.2 ml/min進(jìn)行洗脫,發(fā)現(xiàn)流量過(guò)低,氨基酸分離差且洗脫時(shí)間長(zhǎng),因此確定本實(shí)驗(yàn)流量為1.5 ml/min,能夠使氨基酸達(dá)到基線分離。

高效液相色譜熒光檢測(cè)技術(shù)分析氨基酸克服了紫外檢測(cè)器分析周期長(zhǎng)的缺點(diǎn),更重要的是其靈敏度比紫外檢測(cè)器高,有良好的選擇性,檢測(cè)下限僅是紫外檢測(cè)器的1/10~1/100,更適于微量分析。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果所呈現(xiàn)的規(guī)律與理論規(guī)律完全符合,氨基酸的總含量CG組 < CW組< NM組,各單個(gè)氨基酸的含量不符合上述規(guī)律,這是因?yàn)楣┰嚇悠吩谌斯の敢褐兴獬鲇坞x氨基酸的程度不同。本實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蚝?jiǎn)單、方便、快速、靈敏和準(zhǔn)確可靠地測(cè)定珍珠粉中的15種氨基酸含量,且容易推廣應(yīng)用。因此該法適用于大批量樣品的分析檢測(cè),可成為科研和生產(chǎn)過(guò)程中分析測(cè)定氨基酸的一種優(yōu)先選擇方法。

【參考文獻(xiàn)】

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